Isolement et analyse des lipoprotéines plasmatiques par ultracentrifugation

L’analyse des lipoprotéines et des apolipoprotéines de plasma est une partie essentielle pour le diagnostic de dyslipidémie et les études du métabolisme de lipide et de l’athérosclérose. Bien qu’il existe plusieurs méthodes pour analyser les lipoprotéines plasmatiques, l’ultracentrifugation reste l’une des méthodes les plus populaires et fiables. En raison de sa procédure intacte de séparation, les fractions de lipoprotéine isolées par cette méthode peuvent être employées pour l’analyse des lipoprotéines, des apolipoprotéines, des protéomes, et de l’étude fonctionnelle des lipoprotéines avec des cellules cultured in vitro. Ici, nous fournissons un protocole détaillé pour isoler sept fractions de lipoprotéine comprenant VLDL (d<1.006 g/mL), IDL (d=1.02 g/mL), LDLs (d=1.04 et 1.06 g/mL), HDLs (d=1.08, 1,10 et 1,21 g/mL) provenant du plasma de lapin à l’aide d’ultracentrifugation flottante séquentielle. En outre, nous présentons aux lecteurs comment analyser les apolipoprotéines telles que l’apoA-I, l’apoB et l’apoE par SDS-PAGE et le ballonnement occidental et montrer des résultats représentatifs des profils de lipoprotéine et d’apolipoprotéine utilisant des modèles hyperlipidémiques de lapin. Cette méthode peut devenir un protocole standard pour les cliniciens et les scientifiques de base pour analyser les fonctions lipoprotéines.