Een verbeterd tijd- en arbeidsefficiënt protocol voor primaire hepatocytenisolatie bij muizen

Primaire hepatocyten worden op grote schaal gebruikt in lever in vitro onderzoek, vooral in glucosemetabolisme studies. Een basistechniek is aangepast op basis van verschillende behoeften, zoals tijd, arbeid, kosten en primair hepatocytengebruik, wat resulteert in verschillende primaire hepatocytenisolatieprotocollen. De vele stappen en tijdrovende reagenspreparaten in primaire hepatocytenisolatie zijn echter grote nadelen voor de efficiëntie. Na het vergelijken van verschillende protocollen voor hun voor- en nadelen, werden de voordelen van elk gecombineerd en werd een snel en efficiënt primair hepatocytenisolatieprotocol geformuleerd. Binnen slechts ~ 35 minuten zou dit protocol evenveel, zo niet meer, gezonde primaire hepatocyten kunnen opleveren als andere protocollen. Verder valideerden glucosemetabolisme-experimenten uitgevoerd met behulp van de geïsoleerde primaire hepatocyten het nut van dit protocol in in vitro levermetabolismestudies. We hebben ook uitgebreid de betekenis en het doel van elke stap in deze studie beoordeeld en geanalyseerd, zodat toekomstige onderzoekers dit protocol verder kunnen optimaliseren op basis van behoeften.