Cellefri produksjon av proteoliposomer for funksjonell analyse og antistoffutvikling rettet mot membranproteiner

Membranproteiner spiller viktige roller i en rekke cellulære prosesser og utfører vitale funksjoner. Membranproteiner er medisinsk viktige i narkotikaforskning fordi de er mål for mer enn halvparten av alle legemidler. Et hinder for å gjennomføre biokjemiske, biofysiske og strukturelle studier av membranproteiner samt antistoffutvikling har vært vanskeligheten med å produsere store mengder høykvalitets membranprotein med riktig konformasjon og aktivitet. Her beskriver vi en "dobbeltlagsdialysemetode" ved hjelp av et hvetekimcellefritt system, liposomer og dialysekopper for effektivt å syntetisere membranproteiner og tilberede rensede proteoliposomer på kort tid med høy suksessrate. Membranproteiner kan produseres så mye som i flere milligram, for eksempel GPCR, ionkanaler, transportører og tetraspaniner. Denne cellefrie metoden bidrar til å redusere tid, kostnader og krefter for å forberede proteoliposomer av høy kvalitet, og gir egnede midler for funksjonell analyse av membranproteiner, screening av legemiddelmål og antistoffutvikling.