小鼠视网膜的经瞳双光子体内成像

视网膜将来自环境的光信号转换为传播到大脑的电信号。视网膜疾病很普遍，会导致视力障碍和失明。了解这些疾病如何进展对于制定新的治疗方法至关重要。疾病动物模型中的体内显微镜是了解神经变性的有力工具，并在治疗从阿尔茨海默病到中风等疾病方面取得了重要进展。鉴于视网膜是唯一可以通过光学方法固有的中枢神经系统结构，它自然适合体内成像。然而，晶状体和角膜的原生光学元件对有效的成像访问提出了一些挑战。

该协议概述了以细胞分辨率对小鼠视网膜中的细胞队列和结构进行体内双光子成像的方法，适用于急性和慢性持续时间的成像实验。它提供了使用一套标记技术（包括腺相关病毒 （AAV） 载体、转基因小鼠和无机染料）的视网膜神经节细胞 （RGC）、无分泌细胞、小胶质细胞和血管成像的示例。重要的是，这些技术扩展到视网膜的所有细胞类型，并描述了访问其他感兴趣细胞群的建议方法。还详细介绍了用于显示和量化的手动图像后处理的示例策略。这些技术直接适用于视网膜功能在健康和疾病中的研究。