使用免疫荧光检测斑马鱼胚胎心脏PM_2.5诱发DNA损伤

环境细颗粒物（PM_2.5）暴露可导致心脏发育毒性，但潜在的分子机制尚不清楚。8-羟基-2'脱氧酶（8-OHdG）是氧化DNA损伤的标记，+H2AX是DNA双链断裂的敏感标记。在这项研究中，我们旨在通过免疫荧光检测斑马鱼胚胎心脏的PM_2.5诱导8-OHDG和+H2AX变化。斑马鱼胚胎在受精后2小时（hpf）2小时时，以5微克/mL的PM_2.5 处理可提取的有机物质（EOM）。DMSO 被用作车辆控制。在72马力，心脏被解剖从胚胎使用注射器针和固定和渗透。被阻塞后，用原样抗体对8-OHdG和+H2AX进行探测。然后用二次抗体清洗和孵育样品。由此产生的图像在荧光显微镜下观察，并使用 ImageJ 进行量化。结果表明，EOM从下午_2.5 显著增强8-OHDG和+H2AX信号在斑马鱼胚胎的心脏。然而，NAC作为活性氧物种（ROS）的清除剂，部分抵消了EOM引起的DNA损伤。在这里，我们提出了一个免疫荧光方案，用于研究DNA损伤在PM_2.5诱发的心脏缺陷中的作用，可用于检测斑马鱼胚胎心脏中环境化学诱发的蛋白质表达变化。