Abstract
Developmental Biology
环境细颗粒物(PM2.5)暴露可导致心脏发育毒性,但潜在的分子机制尚不清楚。8-羟基-2'脱氧酶(8-OHdG)是氧化DNA损伤的标记,+H2AX是DNA双链断裂的敏感标记。在这项研究中,我们旨在通过免疫荧光检测斑马鱼胚胎心脏的PM2.5诱导8-OHDG和+H2AX变化。斑马鱼胚胎在受精后2小时(hpf)2小时时,以5微克/mL的PM2.5 处理可提取的有机物质(EOM)。DMSO 被用作车辆控制。在72马力,心脏被解剖从胚胎使用注射器针和固定和渗透。被阻塞后,用原样抗体对8-OHdG和+H2AX进行探测。然后用二次抗体清洗和孵育样品。由此产生的图像在荧光显微镜下观察,并使用 ImageJ 进行量化。结果表明,EOM从下午2.5 显著增强8-OHDG和+H2AX信号在斑马鱼胚胎的心脏。然而,NAC作为活性氧物种(ROS)的清除剂,部分抵消了EOM引起的DNA损伤。在这里,我们提出了一个免疫荧光方案,用于研究DNA损伤在PM2.5诱发的心脏缺陷中的作用,可用于检测斑马鱼胚胎心脏中环境化学诱发的蛋白质表达变化。
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