Raffineret KLARHED-baseret væv Clearing for tre-dimensionelle Fibroblast Organisation i sunde og sårede Mouse Hearts

Hjerte-kar-sygdomme er den mest udbredte årsag til dødelighed på verdensplan og er ofte præget af øget hjertefibrose, der kan føre til øget ventrikelstivhed med ændret hjertefunktion. Denne stigning i hjerte ventrikulær fibrose skyldes aktivering af residente fibroblaster, selv om hvordan disse celler fungerer inden for 3-dimensionelle (3-D) hjerte, ved baseline eller efter aktivering, er ikke godt forstået. For at undersøge, hvordan fibroblaster bidrager til hjertesygdomme og deres dynamik i 3D-hjertet, blev der udviklet en raffineret KLARHED-baseret vævsclearing- og billeddannelsesmetode, der viser fluorescerende mærkede hjertefibroblaster i hele musehjertet. Væv bosiddende fibroblaster blev genetisk mærket ved hjælp af Rosa26-loxP-eGFP florescent reporter mus krydset med hjerte fibroblast udtrykke Tcf21-MerCreMer knock-in linje. Denne teknik blev brugt til at observere fibroblast lokalisering dynamik i hele voksne venstre hjertekammer i raske mus og i fibrotiske mus modeller af hjertesygdomme. Interessant, i en skade model, unikke mønstre af hjerte fibroblaster blev observeret i den skadede mus hjerte, der fulgte bands af indpakkede fibre i kontraktile retning. I iskæmiske skadesmodeller indtraf fibroblastdøden efterfulgt af en genopfyldning fra den infarkte grænsezone. Samlet set giver denne raffinerede hjertevævskonderingsteknik og digitaliserede billeddannelsessystem mulighed for 3D-visualisering af hjertefibroblaster i hjertet uden begrænsninger af antistofindtrængningssvigt eller tidligere problemer omkring tabt fluorescens på grund af vævsbehandling.