生物组织样本的串行块面扫描电子显微镜 （SBF-SEM）

串行块面扫描电子显微镜 （SBF-SEM） 可收集数百到数千张连续注册的超结构图像，为组织显微解剖提供前所未有的三维视图。虽然 SBF-SEM 近年来的使用呈指数级增长，但适当的组织制备和成像参数等技术方面对于这种成像模式的成功至关重要。此成像系统受益于设备的自动化性质，允许显微镜在成像过程中无人看管，并在一天内自动收集数百张图像。然而，如果没有适当的组织制备，细胞超结构可能会被改变，以得出不正确或误导性的结论。此外，图像是通过扫描树脂嵌入生物样本的块面生成的，这通常会带来必须解决的挑战和考虑。成像过程中块内电子的积累，称为"组织充电"，可导致对比度损失和无法欣赏细胞结构。此外，虽然增加电子束强度/电压或降低光束扫描速度可以增加图像分辨率，但这也可能产生破坏树脂块和扭曲成像系列中后续图像的不幸副作用。在这里，我们提出了一个常规协议，准备生物组织样本，以保持细胞超结构和减少组织充电。我们还为快速获取高质量的序列图像提供成像考虑，对组织块的损害最小。