סריקת בלוק-פנים טורית מיקרוסקופ אלקטרונים (SBF-SEM) של דגימות רקמה ביולוגית

מיקרוסקופ אלקטרונים סריקת פרצוף בלוק סדרתי (SBF-SEM) מאפשר איסוף של מאות עד אלפי תמונות אולטרה-מבניות הרשומות באופן סדרתי, ומציע תצוגה תלת מימדית חסרת תקדים של מיקרואנטומיה של רקמות. בעוד SBF-SEM ראתה עלייה אקספוננציאלית בשימוש בשנים האחרונות, היבטים טכניים כגון הכנת רקמות נכונה ופרמטרים הדמיה הם בעלי חשיבות עליונה להצלחת מודאליות הדמיה זו. מערכת הדמיה זו נהנית מהאופי האוטומטי של המכשיר, ומאפשרת להשאיר את המיקרוסקופ ללא השגחה במהלך תהליך ההדמיה, עם איסוף אוטומטי של מאות תמונות אפשריות ביום אחד. עם זאת, ללא הכנת רקמות מתאימה אולטרה מובנה הסלולר ניתן לשנות באופן כזה מסקנות שגויות או מטעות עשוי להסיק. בנוסף, תמונות נוצרות על ידי סריקת פני הבלוק של מדגם ביולוגי מוטבע שרף וזה לעתים קרובות מציג אתגרים ושיקולים שיש לטפל בהם. הצטברות אלקטרונים בתוך הבלוק במהלך ההדמיה, המכונה "טעינת רקמות", עלולה להוביל לאובדן ניגודיות ולחוסר יכולת להעריך את המבנה התאי. יתר על כן, בעוד הגדלת עוצמת קרן אלקטרונים / מתח או הפחתת מהירות סריקת קרן יכול להגביר את רזולוציית התמונה, זה יכול להיות גם תופעת לוואי מצערת של פגיעה בלוק שרף ועיוות התמונות הבאות בסדרת ההדמיה. כאן אנו מציגים פרוטוקול שגרתי להכנת דגימות רקמה ביולוגית המשמרת את המבנה התאי ומפחיתה את טעינת הרקמות. כמו כן, אנו מספקים שיקולי הדמיה לרכישה מהירה של תמונות סדרתיות באיכות גבוהה עם נזק מינימלי לגוש הרקמות.