التحقيق في تكلس الصمام الأبهري عن طريق العزلة وثقافة الخلايا الليمفاوية T باستخدام الخلايا المغذية من معطف بافي المشعع

يرتبط مرض الصمام الأبهري الكالسيومي (CAVD)، وهو عملية مرض نشطة تتراوح بين سماكة خفيفة للصمام إلى تكلس شديد، بارتفاع معدل الوفيات، على الرغم من الخيارات العلاجية الجديدة مثل استبدال الصمام الأبهري عبر القسطرة (TAVR).

المسارات الكاملة التي تبدأ مع تكلس الصمام وتؤدي إلى تضيق الأبهر الشديد لا تزال مفهومة جزئيا فقط. من خلال توفير تمثيل وثيق لخلايا الصمام الأبهري في الجسم الحي ، يمكن أن يكون فحص الخلايا الليمفاوية T من أنسجة الصمام الشهوتي طريقة فعالة لتوضيح دورها في تطوير التكلس. بعد الختان الجراحي ، يتم تشريح عينة الصمام الأبهري الطازجة في قطع صغيرة ويتم استزراع الخلايا الليمفاوية T ، واستنساخها ثم تحليلها باستخدام فرز الخلايا المنشطة الفلورية (FACS).

إجراء تلطيخ بسيط ويمكن أيضا أن تكون ثابتة أنابيب ملطخة باستخدام 0.5٪ من paraformaldehyde وتحليلها حتى 15 يوما في وقت لاحق. ويمكن استخدام النتائج الناتجة عن لوحة تلطيخ لتتبع التغيرات في تركيزات الخلايا التائية مع مرور الوقت فيما يتعلق بالتدخل ويمكن بسهولة مواصلة تطويرها لتقييم حالات التنشيط للأنواع الفرعية المحددة من الخلايا التائية ذات الاهتمام. في هذه الدراسة، نظهر عزلة الخلايا التائية، التي أجريت على عينات الصمام الأبهري المتكلسة الطازجة وخطوات تحليل استنساخ الخلايا التائية باستخدام قياس التدفق الخلوي لزيادة فهم دور المناعة التكيفية في الفيزيولوجيا المرضية CAVD.