Semi-quantitative Bestimmung der dopaminergen Neuronendichte in der Substantia Nigra von Nagetiermodellen mittels automatisierter Bildanalyse

Die Abschätzung der Anzahl dopaminerger Neuronen in der Substantia nigra ist eine Schlüsselmethode in der präklinischen Parkinson-Forschung. Derzeit ist die unvoreingenommene stereologische Zählung der Standard für die Quantifizierung dieser Zellen, aber es bleibt ein mühsamer und zeitaufwendiger Prozess, der möglicherweise nicht für alle Projekte durchführbar ist. Hier beschreiben wir den Einsatz einer Bildanalyseplattform, die die Menge der markierten Zellen in einem vordefinierten Interessenbereich genau abschätzen kann. Wir beschreiben ein Schritt-für-Schritt-Protokoll für diese Analysemethode im Rattengehirn und zeigen, dass es eine signifikante Reduktion der Tyrosinhydroxylase-positiven Neuronen aufgrund der Expression von mutiertem α-Synuclein in der Substantia nigra identifizieren kann. Wir validierten diese Methodik durch Vergleich mit Ergebnissen, die durch unvoreingenommene Stereologie erzielt wurden. Zusammengenommen bietet diese Methode einen zeiteffizienten und genauen Prozess zur Erkennung von Veränderungen der dopaminergen Neuronenzahl und eignet sich somit für die effiziente Bestimmung der Wirkung von Interventionen auf das Zellüberleben.