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Neuroscience

स्वचालित छवि विश्लेषण का उपयोग कर कृंतक मॉडल के सब्सटेंटिया निग्रा में डोपामिनेर्गिक न्यूरॉन घनत्व का अर्ध-मात्रात्मक निर्धारण

Published: February 2nd, 2021

DOI:

10.3791/62062

1Krembil Research Institute, Toronto Western Hospital, University Health Network, 2Department of Laboratory Medicine and Pathobiology, University of Toronto, 3Department of Surgery, Division of Neurosurgery, University of Toronto, 4Department of Medicine, Division of Neurology, University of Toronto, 5Department of Medicine, Division of Neurology, Edmond J. Safra Program in Parkinson's Disease and the Morton and Gloria Shulman Movement Disorders Clinic, Toronto Western Hospital, University Health Network, 6Tanz Centre for Research in Neurodegenerative Diseases, University of Toronto

Abstract

सब्स्टानिया निग्रा में डोपामिनेर्गिक न्यूरॉन्स की संख्या का आकलन प्री-क्लीनिकल पार्किंसंस डिजीज रिसर्च में एक महत्वपूर्ण तरीका है। वर्तमान में, निष्पक्ष स्टीरियोलॉजिकल गिनती इन कोशिकाओं के मात्राकरण के लिए मानक है, लेकिन यह एक श्रमसाध्य और समय लेने वाली प्रक्रिया बनी हुई है, जो सभी परियोजनाओं के लिए व्यवहार्य नहीं हो सकती है। यहां, हम एक छवि विश्लेषण मंच के उपयोग का वर्णन करते हैं, जो ब्याज के पूर्व-परिभाषित क्षेत्र में लेबल कोशिकाओं की मात्रा का सटीक अनुमान लगा सकता है। हम चूहे के मस्तिष्क में विश्लेषण की इस विधि के लिए एक कदम-दर-कदम प्रोटोकॉल का वर्णन करते हैं और प्रदर्शित करते हैं कि यह सब्स्तानटिया निग्रा में उत्परिवर्ती α-सिन्यूक्लिन की अभिव्यक्ति के कारण टायरोसिन हाइड्रोक्सिलेज सकारात्मक न्यूरॉन्स में एक महत्वपूर्ण कमी की पहचान कर सकता है। हमने निष्पक्ष स्टीरियोलॉजी द्वारा प्राप्त परिणामों के साथ तुलना करके इस पद्धति को मान्य किया। एक साथ लिया, यह विधि डोपामिनेर्गिक न्यूरॉन संख्या में परिवर्तन का पता लगाने के लिए एक समय कुशल और सटीक प्रक्रिया प्रदान करती है, और इस प्रकार सेल अस्तित्व पर हस्तक्षेप के प्रभाव के कुशल निर्धारण के लिए उपयुक्त है।

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