Semi-kvantitativ bestemmelse av dopaminerg nevrontetthet i Substantia Nigra av gnagermodeller ved hjelp av automatisert bildeanalyse

Estimering av antall dopaminerge nevroner i substantia nigra er en nøkkelmetode i preklinisk Parkinsons sykdomsforskning. For tiden er objektiv stereologisk telling standarden for kvantifisering av disse cellene, men det forblir en arbeidskrevende og tidkrevende prosess, som kanskje ikke er mulig for alle prosjekter. Her beskriver vi bruken av en bildeanalyseplattform, som nøyaktig kan estimere mengden merkede celler i et forhåndsdefinert interesseområde. Vi beskriver en trinnvis protokoll for denne analysemetoden i rottehjernen og viser at den kan identifisere en betydelig reduksjon i tyrosinhydroksylase positive nevroner på grunn av uttrykk for mutant α-synuklein i substantia nigra. Vi validerte denne metodikken ved å sammenligne med resultater oppnådd ved objektiv stereologi. Samlet gir denne metoden en tidseffektiv og nøyaktig prosess for å oppdage endringer i dopaminerge nevrontall, og er dermed egnet for effektiv bestemmelse av effekten av intervensjoner på celleoverlevelse.