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Immunology and Infection

मुरीन घावों में बायोफिल्म फैलाव का आकलन

Published: August 7th, 2021

DOI:

10.3791/62136

1Department of Surgery, Texas Tech University Health Sciences Center, 2Immunology and Molecular Microbiology, Texas Tech University Health Sciences Center, 3TTUHSC Surgery Burn Center of Research Excellence, Texas Tech University Health Sciences Center
* These authors contributed equally

बायोफिल्म से संबंधित संक्रमण पुरानी स्थितियों की एक विस्तृत श्रृंखला में फंसाया जाता है जैसे गैर-उपचार मधुमेह पैर अल्सर, पुरानी साइनसाइटिस, ओटिटिस मीडिया को फिर से शुरू करना, और कई और अधिक। इन संक्रमणों के भीतर माइक्रोबियल कोशिकाओं को एक बाहकालीन बहुलक पदार्थ (ईपीएस) द्वारा संरक्षित किया जाता है, जो एंटीबायोटिक दवाओं को रोक सकता है और प्रतिरक्षा कोशिकाओं को संक्रमण को साफ करने से रोक सकता है। इस बाधा को दूर करने के लिए, जांचकर्ताओं ने संभावित चिकित्सा विज्ञान के रूप में फैलाव एजेंटों का विकास शुरू कर दिया है । ये एजेंट बायोफिल्म ईपीएस के भीतर विभिन्न घटकों को लक्षित करते हैं, संरचना को कमजोर करते हैं, और बैक्टीरिया के फैलाव की शुरुआत करते हैं, जो सैद्धांतिक रूप से एंटीबायोटिक शक्ति और प्रतिरक्षा निकासी में सुधार कर सकते हैं। घाव संक्रमण के लिए फैलाव एजेंटों की प्रभावकारिता निर्धारित करने के लिए, हमने प्रोटोकॉल विकसित किए हैं जो बायोफिल्म फैलाव को पूर्व वीवो और वीवोदोनों में मापते हैं। हम एक माउस सर्जिकल एक्सिसेशन मॉडल का उपयोग करते हैं जिसे बायोफिल्म से जुड़े पुराने घाव संक्रमण बनाने के लिए अच्छी तरह से वर्णित किया गया है। वीवो मेंफैलाव की निगरानी के लिए, हम घावों को बैक्टीरियल उपभेदों से संक्रमित करते हैं जो लूसिफ़ेरेस व्यक्त करते हैं। एक बार परिपक्व संक्रमण स्थापित हो जाने के बाद, हम एंजाइमों वाले समाधान के साथ घावों की सिंचाई करते हैं जो बायोफिल्म ईपीएस के घटकों को नीचा दिखाते हैं। फिर हम प्राप्त फैलाव के स्तर के बारे में जानकारी प्रदान करने के लिए घाव और छानने वाले अंगों में ल्यूमिनेसेंट सिग्नल के स्थान और तीव्रता की निगरानी करते हैं। बायोफिल्म फैलाव के पूर्व वीवो विश्लेषण के लिए, संक्रमित घाव ऊतक बायोफिल्म-अपमानजनक एंजाइम समाधान में डूबे हुए हैं, जिसके बाद ऊतक में शेष बैक्टीरियल लोड, बनाम समाधान में बैक्टीरियल लोड का आकलन किया जाता है। दोनों प्रोटोकॉल में ताकत और कमजोरियां हैं और फैलाव उपचार की प्रभावकारिता को सही ढंग से निर्धारित करने में मदद करने के लिए अनुकूलित किया जा सकता है।

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