Abstract
Immunology and Infection
Biofilmrelaterte infeksjoner er involvert i et bredt spekter av kroniske tilstander som ikke-helbredende diabetiske fotsår, kronisk bihulebetennelse, tilbakevendende otitis media og mange flere. Mikrobielle celler i disse infeksjonene er beskyttet av et ekstracellulært polymerstoff (EPS), som kan forhindre antibiotika og være vert for immunceller fra å fjerne infeksjonen. For å overvinne dette hinderet har etterforskere begynt å utvikle spredningsmidler som potensielle terapeutiske midler. Disse midlene retter seg mot ulike komponenter i biofilm-EPS, svekker strukturen og initierer spredning av bakteriene, noe som teoretisk kan forbedre antibiotikastyrken og immunclearance. For å bestemme effekten av dispergeringsmidler for sårinfeksjoner, har vi utviklet protokoller som måler biofilm dispergering både ex vivo og in vivo. Vi bruker en musekirurgisk eksisjonsmodell som er godt beskrevet for å skape biofilmrelaterte kroniske sårinfeksjoner. For å overvåke sprednings in vivo, smitter vi sårene med bakteriestammer som uttrykker luciferase. Når modne infeksjoner har etablert seg, irrigerer vi sårene med en løsning som inneholder enzymer som forringer komponenter i biofilm EPS. Vi overvåker deretter plasseringen og intensiteten av lystetthetssignalet i sår- og filtreringsorganene for å gi informasjon om nivået av spredning oppnådd. For ex vivo-analyse av biofilmspredning er infisert sårvev nedsenket i biofilmnedbrytende enzymoppløsning, hvorpå bakteriebelastningen som gjenstår i vevet, kontra bakteriebelastningen i løsningen, vurderes. Begge protokollene har styrker og svakheter og kan optimaliseres for å bidra til å nøyaktig bestemme effekten av spredningsbehandlinger.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved