Bedömning av biofilmsspridning i murinsår

Biofilm-relaterade infektioner är inblandade i ett brett spektrum av kroniska tillstånd såsom icke-helande diabetiker fotsår, kronisk bihåleinflammation, återkommande öroninflammationer media, och många fler. Mikrobiella celler i dessa infektioner skyddas av en extracellulär polymera substans (EPS), som kan förhindra antibiotika och vara värd för immunceller från att rensa infektionen. För att övervinna detta hinder har utredarna börjat utveckla spridningsmedel som potentiella terapier. Dessa medel riktar sig till olika komponenter inom biofilmen EPS, försvagar strukturen och initierar spridning av bakterierna, vilket teoretiskt kan förbättra antibiotikapotens och immunfrihet. För att bestämma effekten av spridningsmedel för sårinfektioner har vi utvecklat protokoll som mäter biofilmsspridning både ex vivo och in vivo. Vi använder en mus kirurgiska excision modell som har beskrivits väl för att skapa biofilm-associerade kroniska sår infektioner. För att övervaka spridning in vivoinfekterar vi såren med bakteriestammar som uttrycker luciferas. När mogna infektioner har etablerats bevattnar vi såren med en lösning som innehåller enzymer som försämrar komponenter i biofilmen EPS. Vi övervakar sedan platsen och intensiteten hos den självlysande signalen i såret och filtreringsorganen för att ge information om den spridningsnivå som uppnåtts. För ex vivo-analys av biofilmsdispersion är infekterad sårvävnad nedsänkt i biofilmsnedbrytande enzymlösning, varefter bakteriebelastningen som finns kvar i vävnaden, jämfört med bakteriebelastningen i lösningen, bedöms. Båda protokollen har styrkor och svagheter och kan optimeras för att noggrant bestämma effekten av spridningsbehandlingar.