Isolasjon og tidsforløpavbildning av primære mus embryonale palatale mesenchymeceller for å analysere kollektive bevegelsesattributter

Utviklingen av ganen er en dynamisk prosess, som innebærer vertikal vekst av bilaterale palatale hyller ved siden av tungen etterfulgt av høyde og fusjon over tungen. Defekter i denne prosessen fører til kløft gane, en vanlig fødselsdefekt. Nyere studier har vist at palasshyllehøyde innebærer en ombyggingsprosess som forvandler retningen på hyllen fra vertikal til horisontal. Rollen til palatalhyllen mesenchymale celler i denne dynamiske ombyggingen har vært vanskelig å studere. Tidsforløp-avbildningsbasert kvantitativ analyse har nylig blitt brukt til å vise at primære mus embryonale palatal mesenchymale (MEPM) celler kan selv organisere seg i en kollektiv bevegelse. Kvantitative analyser kan identifisere forskjeller i mutante MEPM-celler fra en musemodell med ganehøydefeil. Dette dokumentet beskriver metoder for å isolere og dyrke MEPM-celler fra E13.5 embryoer - spesielt for tidsforløpavbildning - og for å bestemme ulike cellulære attributter for kollektiv bevegelse, inkludert tiltak for strømdannelse, formjustering og utholdenhet i retning. Det hevder at MEPM-celler kan tjene som en proxy-modell for å studere rollen som palatalhylle mesenchyme under den dynamiske høydeprosessen. Disse kvantitative metodene vil gjøre det mulig for etterforskere i kraniofacialfeltet å vurdere og sammenligne kollektive bevegelsesattributter i kontroll- og mutantceller, noe som vil øke forståelsen av mesenchymal ombygging under palatal hyllehøyde. Videre gir MEPM-celler en sjelden mesenchymal cellemodell for undersøkelse av kollektiv cellebevegelse generelt.