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Immunology and Infection

CRISPR/CasRx를 사용하여 드로소필라 멜라노가스터 에서 유비쿼터스 및 조직 별 RNA 표적화

Published: February 5th, 2021

DOI:

10.3791/62154

1Division of Biological Sciences, Section of Cell and Developmental Biology, University of California

Abstract

CASRx, RNA 표적 Cas13 가족의 일원은, 세포와 유기체 수준 둘 다에 매력적인 오프 표적 단면도를 가진 효율적인 유전자 전사량 감소에 있는 CRISPR/Cas 기술의 유망한 새로운 추가입니다. 그것은 최근 CRISPR/CasRx 시스템은 Drosophila 멜라노가스터에 있는 유비쿼터스 및 조직 특정 유전자 성적증명서 감소를 달성하기 위하여 이용될 수 있다는 것을 보고됩니다. 본 논문은 2성분 CasRx 시스템을 이용하여 생체 내생 RNA 표적화의 3개 부분으로 구성된 최근 작업에서 의 방법을 자세히 설명한다. 2) 3성분 CasRx 시스템을 이용한 생체 외인성 RNA 표적화에서 유비쿼터스; 및 3) 3성분 CasRx 시스템을 이용한 생체 내 RNA 표적질내 조직별. 관찰된 RNA 표적화의 효력은 CasRx 단백질 및 부수적 활동의 높은 발현과 관련되었던 표적 유전자 특정 표현표 변경, 표적으로 한 RNA 전사량 감소 및 간헐적인 치사성 표현형을 포함합니다. 전반적으로, 이러한 결과는 CasRx 시스템이 프로그래밍 가능하고 효율적인 방식으로 유기체 수준에서 표적 RNA 전사 감소를 할 수 있음을 보여주었으며, 생체 내 전사 타겟팅, 엔지니어링이 실현 가능하고 생체 내 CRISPR 기반 RNA 표적화 기술의 미래를 위한 토대를 마련한다는 것을 입증했다.

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