iPSCマクロファージによる死んだ神経芽細胞の食細胞に対するインビトロ定量イメージングアッセイ

ミクログリアは、パーキンソン病やアルツハイマー病を含むいくつかの神経変性疾患における神経免疫応答を調整します。ミクログリアは、食細胞性の特殊な形態である食細胞性のプロセスを通じて、死んで死んでいるニューロンをクリアします。貪食機能は、ミクログリアに影響を与える環境または遺伝的危険因子によって破壊される可能性があります。本論文は、過食性貨物に対してpH感受性色素を標識したヒト神経芽細胞細胞株(SH-SY5Y)を用いて、ミクログリアの人工多能性幹細胞(iPSC)モデルにおける微小性分胸細胞症を研究するための迅速かつ簡単なインビトロ顕微鏡プロトコルを提示する。この手順は、食細胞によって「eat-me」シグナルとして認識される表面ホスファチジルセリンを表示する死んだ神経芽細胞細胞の高い収率をもたらす。96ウェルプレートアッセイは、ライブセルタイムラプスイメージングに適しているか、またはプレートをさらなる処理の前に正常に固定し、高含有顕微鏡で定量することができます。固定細胞高含有顕微鏡検査により、アッセイをスケールアップして、小分子阻害剤のスクリーニングや、遺伝的変異型iPSCラインの貪食機能を評価することができます。このアッセイは、iPSCマクロファージによる全死神経芽細胞細胞の貪食を研究するために開発されたが、シナプトソームやミエリン、その他の貪食細胞タイプなどの神経変性疾患に関連する他のカルゴに容易に適応させることができる。