في الجسم الحي تصوير الكالسيوم في الزيتون السفلي الماوس

الزيتون السفلي (IO) ، نواة في النخاع البطني ، هو المصدر الوحيد لتسلق الألياف التي تشكل أحد مساري الإدخال اللذين يدخلان المخيخ. منذ فترة طويلة اقترح IO أن تكون حاسمة للتحكم في المحركات ويعتبر نشاطها حاليا أن يكون في مركز العديد من الفرضيات من كل من الوظائف الحركية والمعرفية للماخيخ. في حين أن علم وظائف الأعضاء ووظيفته قد درست بشكل جيد نسبيا على مستوى خلية واحدة في المختبر، في الوقت الحاضر لا توجد تقارير عن تنظيم نشاط شبكة IO في الحيوانات الحية. ويرجع ذلك إلى حد كبير إلى الموقع التشريحي الصعب للغاية ل IO ، مما يجعل من الصعب الخضوع لطرق التصوير الفلورية التقليدية ، حيث يجب إنشاء مسار بصري من خلال الدماغ بأكمله الموجود بشكل الظهري إلى المنطقة ذات الاهتمام.

هنا نحن وصف طريقة بديلة للحصول على أحدث مستوى الكالسيوم التصوير البيانات من شبكة IO. تستفيد الطريقة من الموقع البطني الشديد ل IO وتنطوي على إجراء جراحي لإدخال عدسة مؤشر الانكسار المتدرجة (GRIN) من خلال أحشاء الرقبة لتلامس السطح البطني لمستشعر الكالسيوم GCaMP6s-Expressing IO في الفئران المخدرة. يظهر تسجيل تصوير الكالسيوم التمثيلي لإثبات جدوى تسجيل نشاط الخلايا العصبية IO بعد الجراحة. في حين أن هذه هي عملية جراحية غير البقاء على قيد الحياة ويجب إجراء التسجيلات تحت التخدير، فإنه يتجنب الضرر لنوى جذع الدماغ الحرجة للحياة ويسمح بإجراء مجموعة كبيرة ومتنوعة من التجارب التحقيق في أنماط النشاط الصدغي ملعقة والتكامل المدخلات في IO. يمكن استخدام هذا الإجراء مع تعديلات للتسجيلات في مناطق أخرى مجاورة من جذع الدماغ البطني.