A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Abstract
Biology
ERRATUM NOTICE
Important: There has been an erratum issued for this article. Read more …Förster Resonance Energy Transfer (FRET) er den strålingsfrie overføringen av energi fra en eksitert donor til et akseptormolekyl og avhenger av molekylets avstand og orientering, samt omfanget av overlapping mellom donorutslipp og akseptorabsorpsjonsspektra. FRET tillater å studere samspillet mellom proteiner i levende celle over tid og i forskjellige subcellulære rom. Ulike intensitetsbaserte algoritmer for å måle FRET ved mikroskopi er beskrevet i litteraturen. Her er en protokoll og en algoritme gitt for å kvantifisere FRET-effektivitet basert på måling av både sensibilisert utslipp av akseptoren og slukking av donormolekylet. Kvantifiseringen av ratiometrisk FRET i den levende cellen krever ikke bare bestemmelse av crosstalk (spektral spill-over, eller bleed-through) av fluorescerende proteiner, men også deteksjonseffektiviteten til det mikroskopiske oppsettet. Protokollen som er gitt her, beskriver hvordan man vurderer disse kritiske parametrene.
Erratum
Erratum: Assessing Protein Interactions in Live-Cells with FRET-Sensitized EmissionAn erratum was issued for: Assessing Protein Interactions in Live-Cells with FRET-Sensitized Emission. The Authors section was updated from:
György Vámosi1
Sarah Miller2
Molika Sinha2
Gabor Mocsár1
Malte Renz2
1Department of Biophysics and Cell Biology, Faculty of Medicine, University of Debrecen
2Gynecologic Oncology Division, Stanford University School of Medicine
to:
György Vámosi1
Sarah Miller2
Molika Sinha2
Maria Kristha Fernandez2
Gabor Mocsár1
Malte Renz2
1Department of Biophysics and Cell Biology, Faculty of Medicine, University of Debrecen
2Gynecologic Oncology Division, Stanford University School of Medicine
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved