वयस्क माउस स्वाद स्टेम सेल से प्राप्त भाषाई ऑर्गेनॉइड की पीढ़ी और संस्कृति

स्वाद की भावना जीभ पर स्वाद कलियों द्वारा मध्यस्थता की जाती है, जो तेजी से नवीनीकरण स्वाद रिसेप्टर कोशिकाओं (टीआरसी) से बना होते हैं। यह नित्य कारोबार स्थानीय जनक कोशिकाओं द्वारा संचालित होता है और चिकित्सा उपचारों की एक भीड़ द्वारा व्यवधान से ग्रस्त स्वाद कार्य प्रदान करता है, जो बदले में जीवन की गुणवत्ता को गंभीर रूप से प्रभावित करता है। इस प्रकार, दवा उपचार के संदर्भ में इस प्रक्रिया का अध्ययन यह समझने के लिए महत्वपूर्ण है कि स्वाद जनक समारोह और टीआरसी उत्पादन कैसे प्रभावित होते हैं। नैतिक चिंताओं और मानव स्वाद ऊतक की सीमित उपलब्धता को देखते हुए, माउस मॉडल, जो मनुष्यों के समान एक स्वाद प्रणाली है, आमतौर पर उपयोग किया जाता है । वीवो विधियों की तुलना में, जो समय लेने वाले, महंगे हैं, और उच्च थ्रूपुट अध्ययनों के लिए उत्तरदायी नहीं हैं, मुरीन भाषाई ऑर्गेनॉइड कई प्रतिकृति और कम चूहों के साथ तेजी से चलाने के लिए प्रयोगों को सक्षम कर सकते हैं। यहां, पहले प्रकाशित प्रोटोकॉल को अनुकूलित किया गया है और वयस्क चूहों के परिष्कार पैपिला (सीवीपी) से अलग स्वाद जनक कोशिकाओं से स्वाद ऑर्गेनॉइड पैदा करने के लिए एक मानकीकृत विधि प्रस्तुत की गई है। सीवीपी एक्सप्रेस एलजीआर 5 में प्रोजेनिटर कोशिकाओं का स्वाद लें और एलजीआर 5^{ईजीएफपी-आईईईएस-क्रेर्ट2} एलील ले जाने वाले चूहों से ईजीएफपी फ्लोरेसेंस-एक्टिवेटेड सेल सॉर्टिंग (FACS) के माध्यम से अलग किया जा सकता है। सॉर्ट कोशिकाओं को मैट्रिक्स जेल-आधारित 3 डी संस्कृति प्रणाली पर चढ़ाया जाता है और 12 दिनों के लिए सुसंस्कृत किया जाता है। ऑर्गेनॉइड प्रसार के माध्यम से संस्कृति अवधि के पहले 6 दिनों के लिए विस्तार करते हैं और फिर एक भेदभाव चरण में प्रवेश करते हैं, जिसके दौरान वे गैर-स्वाद एपिथेलियल कोशिकाओं के साथ सभी तीन स्वाद सेल प्रकार उत्पन्न करते हैं। ऑर्गेनॉइड को आरएनए अभिव्यक्ति और इम्यूनोहिस्टोकेमिकल विश्लेषण के लिए विकास प्रक्रिया के दौरान 12 दिन या किसी भी समय परिपक्वता पर काटा जा सकता है। वयस्क स्टेम कोशिकाओं से भाषाई ऑर्गेनॉइड के उत्पादन के लिए संस्कृति विधियों का मानकीकरण प्रजनन क्षमता में सुधार करेगा और स्वाद की शिथिलता का सामना करने वाले रोगियों की मदद करने के लिए लड़ाई में एक शक्तिशाली दवा स्क्रीनिंग उपकरण के रूप में भाषाई ऑर्गेनॉइड को आगे बढ़ाएगा।