Somitogenesis를 지배하는 신호 진동의 기능적 조사를위한 미세 유체 학적 접근법

발달하는 마우스 배아의 전소성 중배엽의 주기적 분할은 신호전달 경로의 네트워크에 의해 조절된다. 신호 진동과 기울기는 각각 세그먼트 형성의 타이밍과 간격을 제어하는 것으로 생각됩니다. 관련된 신호 전달 경로가 지난 수십 년 동안 광범위하게 연구되었지만, somitogenesis를 제어하는 신호 진동의 기능에 대한 직접적인 증거는 부족했습니다. 신호 역학의 기능적 조사를 가능하게하기 위해, 미세 유체학은 이러한 역학의 미묘한 변조를위한 이전에 확립 된 도구입니다. 이 미세유체 기반 연행 접근법을 통해 내인성 신호 진동은 경로 조절기의 펄스에 의해 동기화됩니다. 이것은 예를 들어, 진동 기간 또는 두 진동 경로 사이의 위상 관계의 변조를 가능하게 한다. 또한, 경로 조절제의 공간 구배는 조직을 따라 확립되어 신호 구배의 특정 변화가 소미토제네시스에 어떻게 영향을 미치는지 연구할 수 있다.

본 프로토콜은 미세유체학의 최초 사용자를 위한 미세유체 접근법을 확립하는 것을 돕기 위한 것이다. 미세 유체 시스템을 설정하는 데 필요한 기본 원리와 장비가 설명되고 칩 설계가 제공되어 3D 프린터를 사용하여 칩 생성을위한 금형을 편리하게 준비 할 수 있습니다. 마지막으로, 미세유체 칩 상에서 일차 마우스 조직을 배양하는 방법 및 경로 조절제의 외부 펄스에 대한 신호전달 진동을 수반하는 방법이 논의된다.

이러한 미세유체 시스템은 또한 다른 맥락에서 신호전달 역학 및 모르포겐 구배의 기능적 조사를 위해 위스트룰로이드 및 오가노이드와 같은 다른 생체 내 및 시험관내 모델 시스템을 보유하도록 적응될 수 있다.