Forberedelse af prøvestøttefilm i transmissionselektronmikroskopi ved hjælp af en støtteflådsblok

Strukturbestemmelse ved kryo-elektronmikroskopi (cryo-EM) er hurtigt vokset i det sidste årti; Prøveforberedelsen er dog fortsat en betydelig flaskehals. Makromolekylære prøver er ideelt afbildet direkte fra tilfældige retninger i et tyndt lag glasagtig is. Men mange prøver er ildfaste til dette, og protein denaturering på luft-vand interface er et fælles problem. For at overvinde sådanne problemer, støtte film-herunder amorf kulstof, grafen, og grafenoxid-kan anvendes til nettet for at give en overflade, som prøver kan befolke, hvilket reducerer sandsynligheden for partikler oplever de skadelige virkninger af luft-vand interface. Anvendelsen af disse sarte understøtninger på gitre kræver imidlertid omhyggelig håndtering for at forhindre brud, luftbåren forurening eller omfattende vaske- og rengøringstrin. En nylig rapport beskriver udviklingen af en brugervenlig flydeblok, der letter befrugtet overførsel af støttefilm direkte til prøven. Brugen af blokken minimerer antallet af manuelle håndteringstrin, der kræves, bevarer støttefilmens fysiske integritet og den tid, hvor hydrofob forurening kan opsamles, hvilket sikrer, at der stadig kan genereres en tynd isfilm. Dette papir giver trin-for-trin protokoller til fremstilling af kulstof, grafen, og grafenoxid understøtter em-undersøgelser.