Analyse af Lipid sammensætning af mycobacteria af tyndt lag kromatografi

Mycobacteria arter kan afvige fra hinanden i vækstraten, tilstedeværelsen af pigmentering, koloni morfologi vises på faste medier, samt andre fænotypiske egenskaber. Men de har alle til fælles den mest relevante karakter af mycobacteria: dens unikke og meget hydrofobiske cellevæg. Mycobacteria arter indeholder en membran-kovalent forbundet kompleks, der omfatter arabinogalactan, peptidoglycan, og lange kæder af mykolic syrer med typer, der adskiller sig mellem mycobacteria arter. Derudover kan mycobacteria også producere lipider, der er placeret, ikke-kovalent forbundet, på deres celleoverflader, såsom phthiocerol dimycocerosates (PDIM), phenol glycolipider (PGL), glycopeptidolipids (GPL), acyltrehaloses (AT) eller fosphatidil-inositol mannosider (PIM), blandt andre. Nogle af dem betragtes virulensfaktorer i patogen mykobakteri eller kritiske antigene lipider i værts-mykobakterier interaktion. Af disse grunde er der en betydelig interesse i studiet af mykobakterielle lipider på grund af deres anvendelse på flere områder, fra at forstå deres rolle i patogeneligheden af mykobakterier til en mulig implikation som immunmodulerende midler til behandling af smitsomme sygdomme og andre patologier som kræft. Her præsenteres en simpel tilgang til at udtrække og analysere det samlede lipidindhold og mykolicsyresammensætningen af mykobakterier, der dyrkes i et solidt medium ved hjælp af blandinger af organiske opløsningsmidler. Når lipidekstrakterne er opnået, udføres tyndt lag kromatografi (TLC) for at overvåge de ekstraherede forbindelser. Eksemplet eksperiment udføres med fire forskellige mycobacteria: de miljømæssige hurtigt voksende Mycolicibacterium brumae og Mycolicibacterium fortuitum, den svækkede langsomt voksende Mycobacterium bovis bacillus Calmette-Guérin (BCG), og den opportunistiske patogen hurtigt voksende Mycobacterium byld, der viser, at metoder vist i den nuværende protokol kan bruges til en bred vifte af mycobacteria.