Abstract
Developmental Biology
אורגנואידים של כליות שנוצרו מ-hPSCs סיפקו מקור בלתי מוגבל של רקמת כליה. אורגנואידים של כליות אנושיות הם כלי רב ערך לחקר מחלות כליות ופציעות, לפיתוח טיפולים מבוססי תאים ולבדיקת טיפולים חדשים. עבור יישומים כאלה, יש צורך במספר רב של אורגנואידים אחידים ומבחנים הניתנים לשחזור. בנינו על פרוטוקול האורגנואידים הכליתי שפורסם בעבר כדי לשפר את הבריאות הכללית של האורגנואידים. פרוטוקול תלת-ממדי פשוט וחזק זה כולל היווצרות של גופים עובריים אחידים במדיום רכיב מינימלי המכיל שומנים, תוסף אינסולין-טרנספרין-סלניום-אתנולמין ואלכוהול פוליוויניל עם מעכב GSK3 (CHIR99021) למשך 3 ימים, ולאחר מכן תרבית במדיום המכיל תחליף סרום נוק-אאוט (KOSR). בנוסף, בדיקות תסיסה מאפשרות הפחתה בהתגוששות של הגוף העוברי ושמירה על גודל אחיד, החשוב לצמצום השונות בין האורגנואידים. בסך הכל, הפרוטוקול מספק שיטה מהירה, יעילה וחסכונית ליצירת כמויות גדולות של אורגנואידים בכליות.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved