En förenklad metod för att generera njurorganoider från humana pluripotenta stamceller

Njurorganoider genererade från hPSC har gett en obegränsad källa till njurvävnad. Mänskliga njurorganoider är ett ovärderligt verktyg för att studera njursjukdom och skada, utveckla cellbaserade terapier och testa nya terapier. För sådana tillämpningar behövs ett stort antal enhetliga organoider och mycket reproducerbara analyser. Vi har byggt vidare på vårt tidigare publicerade njurorganoidprotokoll för att förbättra organoidernas allmänna hälsa. Detta enkla, robusta 3D-protokoll involverar bildandet av enhetliga embryoidkroppar i minsta komponentmedium innehållande lipider, insulin-transferrin-selen-etanolamintillskott och polyvinylalkohol med GSK3-hämmare (CHIR99021) i 3 dagar, följt av odling i utslagssersättning av serumersättning (KOSR) -innehållande medium. Dessutom möjliggör agiterande analyser minskning av klumpning av embryoidkropparna och upprätthållande av en enhetlig storlek, vilket är viktigt för att minska variationen mellan organoider. Sammantaget ger protokollet en snabb, effektiv och kostnadseffektiv metod för att generera stora mängder njurorganoider.