Использование культуры органов типа Trowell для изучения регуляции стоматологических стволовых клеток

Развитие, функция и регенерация органов зависят от стволовых клеток, которые находятся в дискретных анатомических пространствах, называемых нишами стволовых клеток. Постоянно растущий мышиный резец обеспечивает отличную модель для изучения тканеспецифических стволовых клеток. Эпителиальные тканеспецифические стволовые клетки резца расположены на проксимальном конце зуба в нише, называемой шейной петлей. Они обеспечивают непрерывный приток клеток для уравновешивания постоянного истирания самозатачивающегося кончика зуба. Здесь представлен подробный протокол выделения и культивирования проксимального конца мышиного резца, в котором находятся стволовые клетки и их ниша. Это модифицированный протокол посева органов типа Trowell, который позволяет выращивать in vitro кусочки ткани (экспланты), а также толстые срезы ткани на границе раздела жидкость/воздух на фильтре, поддерживаемом металлической сеткой. Протокол посева органов, описанный здесь, позволяет проводить манипуляции с тканями, невозможные in vivo, и в сочетании с использованием флуоресцентного репортера (репортеров) он обеспечивает платформу для идентификации и отслеживания дискретных популяций клеток в живых тканях с течением времени, включая стволовые клетки. Различные регуляторные молекулы и фармакологические соединения могут быть протестированы в этой системе на предмет их влияния на стволовые клетки и их ниши. Это в конечном итоге обеспечивает ценный инструмент для изучения регуляции и поддержания стволовых клеток.