Abstract
Biochemistry
RNA, yapılardaki değişikliklerin RNA moleküllerinin hücresel haberciler ve modülatörler olarak yürüttüğü işlevlerde önemli roller oynadığı son derece esnek bir biyomoleküldür. Bu dinamik durumlar çoğu yapısal yönteme gizli kalırken, R1φ gevşeme dağılımı (RD) spektroskopisi, mikro-milisaniye rejimindeki konformasyonsal dinamiklerin atomik çözünürlükte incelenmesini sağlar. Gözlemlenen çekirdek olarak 1H'nin kullanılması, kapsanan zaman rejimini daha da genişletir ve hidrojen bağlarına ve baz eşleştirmesine doğrudan erişim sağlar.
Böyle bir çalışmadaki zorlu adımlar, potansiyel olarak 13 C ve 15 Netiketli yüksek saflık ve yüksek verimli numune hazırlamanın yanı sıra, daha önce görünmeyen devletin popülasyonunu, döviz kurunu ve ikincil yapısını çıkarmak için deneylerin kurulumu ve verilerin takılmasıdır. Bu protokol, uygun bir RNA örneğinin hazırlanmasını ve hem izotopik olarak etiketlenmiş hem de etiketlenmemiş RNA örnekleriyle 1H R1φ deneyinin kurulumunu sağlamak için numune hazırlamada çok önemli uygulamalı adımlar sağlar.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved