In Situ Udforskning af Murine Megakaryopoiesis ved hjælp af Transmission ElektronMikroskopi

Differentiering og modning af megakaryocytter forekommer i tæt samarbejde med de cellulære og ekstracellulære komponenter i knoglemarven. Disse processer er karakteriseret ved den gradvise forekomst af væsentlige strukturer i megakaryocytcytcytoplasmaet som en polyploid og polylobuleret kerne, et internt membrannetværk kaldet afgrænsning membransystem (DMS) og de tætte og alfagranulat, der vil blive fundet i cirkulerende blodplader. I denne artikel beskriver vi en standardiseret protokol for in situ ultrastrukturelle undersøgelse af murine megakaryocytter ved hjælp af transmissionselektronmikroskopi (TEM), der giver mulighed for identifikation af nøglekarakteristika, der definerer deres modningsstadium og cellulær tæthed i knoglemarven. Knoglemarv er skyllet, fast, dehydreret i ethanol, indlejret i plastharpiks, og monteret til generering af tværsnit. Halvtynde og tynde sektioner er forberedt til henholdsvis histologiske og TEM-observationer. Denne metode kan bruges til enhver knoglemarvscelle, i enhver EM-facilitet og har den fordel at bruge små prøvestørrelser, der giver mulighed for kombinationen af flere billeddannelsesmetoder på den samme mus.