In situ Utforskning av Murine Megakaryopoiesis ved hjelp av Transmission Electron Microscopy

Differensiering og modning av megakaryocytter forekommer i nær tilknytning til de cellulære og ekstracellulære komponentene i benmargen. Disse prosessene er preget av gradvis utseende av essensielle strukturer i megakaryocytt cytoplasma som en polyploid og polylobulert kjerne, et internt membrannettverk kalt avgrensningsmembransystem (DMS) og de tette og alfagranulatene som finnes i sirkulerende blodplater. I denne artikkelen beskriver vi en standardisert protokoll for in situ ultrastrukturell studie av murine megakaryocytter ved hjelp av transmisjonselektronmikroskopi (TEM), noe som muliggjør identifisering av nøkkelegenskaper som definerer modningsstadiet og cellulær tetthet i benmargen. Benmarger skylles, festes, dehydreres i etanol, innebygd i plastharpiks og monteres for å generere tverrsnitt. Semitynne og tynne seksjoner er forberedt på henholdsvis histologiske og TEM observasjoner. Denne metoden kan brukes til en hvilken som helst benmargcelle, i ethvert EM-anlegg og har fordelen av å bruke små prøvestørrelser som tillater kombinasjonen av flere bildemetoder på samme mus.