Abstract
Cancer Research
Kræft-associerede fibroblaster (CAFs) er centrale aktører i forbindelse med tumor mikromiljø. På trods af at være reduceret i antal i forhold til tumorceller, CAF'er regulere tumor progression og yde beskyttelse mod antitumor immunitet. Nye anticancer strategier har til formål at ombygge tumor mikromiljø gennem ablation af pro-tumorigenic CAFs eller omprogrammering af CAFs funktioner og deres aktivering status. En lovende tilgang er udviklingen af nanosized leveringsmidler, der er i stand til at målrette CAF'er, hvilket muliggør specifik levering af lægemidler og aktive molekyler. I den forbindelse kan en cellulær model af CAF'er være et nyttigt redskab til in vitro-screening og indledende undersøgelse af sådanne nanoformuleringer.
Denne undersøgelse beskriver isolation og kultur af primære CAF'er fra syngeneic 4T1 murine model af triple-negativ brystkræft. Magnetiske perler blev brugt i en 2-trins adskillelse proces til at udtrække CAF'er fra dissocierede tumorer. Immunophenotyping-kontrol blev udført ved hjælp af flowcytometri efter hver passage for at kontrollere procesudbyttet. Isolerede CAF'er kan anvendes til at studere målretning kapacitet forskellige nanoformuleringer designet til at tackle tumor mikromiljø. Fluorescerende mærket H-ferritin nanocages blev brugt som kandidat nanopartikler til at oprette metoden. Nanopartikler, enten nøgne eller konjugeret med en målretning ligand, blev analyseret for deres binding til CAF'er. Resultaterne tyder på, at ex vivo udvinding af bryst CAF'er kan være et nyttigt system til at teste og validere nanopartikler til specifik målretning af tumorigenic CAFs.
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved