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Medicine

体外实验性硬化模型:脂质超载介质中的肝细胞培养

Published: May 18th, 2021

DOI:

10.3791/62543

1Laboratorio de Hígado, Páncreas y Motilidad, Unidad de Medicina Experimental, Facultad de Medicina-UNAM, Hospital General de México “Dr. Eduardo Liceaga”

代谢功能障碍相关的脂肪肝疾病(MAFLD),以前被称为非酒精性脂肪肝疾病(NAFLD),是全世界最普遍的肝脏疾病,因为它与肥胖症、糖尿病2型和脂质血症有关。肝硬化是肝炎、纤维化和末期肝病中观察到的炎症之前疾病的一个关键特征,它积累在肝炎中。肝细胞中的脂质积累可能会干扰异生物和内源分子的正常代谢,并诱导导致疾病进展的细胞过程。虽然在 体内可以进行硬化实验研究,但 体外 研究硬化的方法是具有不同优势的互补工具。脂质超载介质中的肝细胞培养是研究肝硬化的极好可重复选择,它能够识别与脂质积累相关的细胞过程,如氧化和网状压力、自噬、增殖、细胞死亡等,以及包括药物有效性、毒理学测试等许多其他可能应用的其他测试。在这里,它的目的是描述肝细胞培养在脂质超载调节介质的方法。HepG2细胞在RMPI 1640中型中培养,以棕榈酸钠和油酸钠为条件。重要的是,这两种脂质的比例对于有利于脂质液滴积累至关重要,同时保持细胞增殖和中等死亡率,就像疾病期间肝脏中发生的情况一样。该方法,从脂溶液库存的制备,混合物,除了介质,肝细胞培养表现出来。通过这种方法,可以识别肝细胞中易于观察到的油红色 O 染色剂中的脂质液滴,以及增殖/死亡率曲线。

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