마취 및 깨어 있는 행동하는 비인간 영장류 뇌에서 광유전학을 위한 AAV 벡터 주사

광유전학 기술은 신경과학 연구에 혁명을 일으켰으며 신경학적 유전자 치료에서도 동일한 작업을 수행할 준비가 되어 있습니다. 그러나 광유전학의 임상적 사용은 인간과의 신경학적 유사성 때문에 동물 모델, 이상적으로는 비인간 영장류(NHP)에서 안전성과 효능을 입증해야 합니다. 신경 과학 및 의학에 잠재적으로 유용한 후보 벡터의 수는 방대하며 이러한 벡터를 테스트하기위한 고 처리량 수단은 아직 존재하지 않습니다. 따라서, 사후 조직학을 통해 명확하게 확인할 수 있는 NHP 뇌에 바이러스 벡터를 공간적으로나 체적으로 정확하게 여러 번 주사하는 기술이 필요하다. 본원에 기재된 것은 이러한 방법이다. 주입 캐뉼러는 결합 된 폴리 테트라 플루오로 에틸렌과 스테인리스 스틸 튜브로 구성됩니다. 이 캐뉼러는 오토클레이브가 가능하고 일회용이며 최소 로딩량이 적기 때문에 값 비싸고 고농축 바이러스 벡터 용액을 주입하는 데 이상적입니다. 불활성의 적색 염색 미네랄 오일은 죽은 공간을 채우고 벡터 용액으로 눈에 보이는 반월판을 형성하여 주입 속도와 부피를 즉각적이고 정확하게 측정 할 수 있습니다. 오일은 캐뉼라의 뒤쪽에 적재되어 벡터와의 공동 주입 위험을 줄입니다. 캐뉼러는 10 분 안에로드 할 수 있으며 주사는 20 분 안에 할 수 있습니다. 이 절차는 깨어 있거나 마취 된 동물에게 주사하는 데 매우 적합합니다. 고품질 바이러스 벡터를 전달하는 데 사용되는 경우, 이 절차는 광유전 단백질의 강력한 발현을 생성하여 NHP에서 신경 활동 및 행동을 광학적으로 제어할 수 있습니다.