Abstract
Biology
ERRATUM NOTICE
Important: There has been an erratum issued for this article. Read more …Isolevuglandiner (IsoLG'er) er stærkt reaktive gamma ketoaldehyder dannet af H2-isoprostaner gennem lipidperoxidering og tværbundne proteiner, der fører til betændelse og forskellige sygdomme, herunder hypertension. Påvisning af IsoLG-akkumulering i væv er afgørende for at kaste lys over deres involvering i sygdomsprocesserne. Måling af IsoLG'er i væv er imidlertid ekstremt vanskelig, og de nuværende tilgængelige værktøjer, herunder massespektrometrianalyse, er besværlige og ekstremt dyre. Her beskriver vi en ny metode til in situ-påvisning af IsoLG'er i væv ved anvendelse af alkalisk fosfatase-konjugeret D11 ScFv og et rekombinant fagdisplay-antistof produceret i E. coli ved immunofluorescerende mikroskopi. Fire kontroller blev brugt til validering af farvningen: (1) farvning med og uden D11, (2) farvning med bakterielt periplasmatisk ekstrakt med den alkaliske fosfataselinker, (3) irrelevant scFV-antistoffarvning og (4) konkurrencedygtig kontrol med IsoLG før farvningen. Vi demonstrerer effektiviteten af den alkaliske fosfatase-konjugerede D11 i både humant væv og musevæv med eller uden hypertension. Denne metode vil sandsynligvis tjene som et vigtigt redskab til at studere IsoLGs rolle i en lang række sygdomsprocesser.
Erratum
Erratum: Direct Detection of Isolevuglandins in Tissues using a D11 scFv-Alkaline Phosphatase Fusion Protein and ImmunofluorescenceAn erratum was issued for: Direct Detection of Isolevuglandins in Tissues using a D11 scFv-Alkaline Phosphatase Fusion Protein and Immunofluorescence. The Authors section was updated from:
Cassandra Warden1
Alan J. Simmons2
Lejla Pasic3
Sean S. Davies4
Justin H. Layer5
Raymond L. Mernaugh3
Annet Kirabo4,6
1Vanderbilt Eye Institute, Vanderbilt University Medical Center
2Department of Cell and Developmental Biology, Vanderbilt University
3Department of Biochemistry, Vanderbilt University
4Division of Clinical Pharmacology, Department of Medicine, Vanderbilt University Medical Center
5Division of Hematology and Oncology, Indiana University School of Medicine
6Department of Molecular Physiology and Biophysics, Vanderbilt University
to:
Cassandra Warden1
Alan J. Simmons2
Lejla Pasic3
Ashley Pitzer4,6
Sean S. Davies4
Justin H. Layer5
Raymond L. Mernaugh3
Annet Kirabo4,6
1Vanderbilt Eye Institute, Vanderbilt University Medical Center
2Department of Cell and Developmental Biology, Vanderbilt University
3Department of Biochemistry, Vanderbilt University
4Division of Clinical Pharmacology, Department of Medicine, Vanderbilt University Medical Center
5Division of Hematology and Oncology, Indiana University School of Medicine
6Department of Molecular Physiology and Biophysics, Vanderbilt University
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved