एक्टिनोमाइसिन डी-उपचारित सिहा ग्रीवा कैंसर कोशिकाओं में एपोप्टोटिक बायोमार्कर का फ्लो साइटोमेट्रिक विश्लेषण

एपोप्टोसिस बायोमाकर्स की जांच एक बेंचटॉप फ्लो साइटोमीटर का उपयोग करके एक्टिनोमाइसिन डी-उपचारित सिहा गर्भाशय ग्रीवा कैंसर कोशिकाओं में की गई थी। एपोप्टोसिस के प्रारंभिक बायोमाकर्स (एनेक्सिन वी और माइटोकॉन्ड्रियल झिल्ली क्षमता) और देर से बायोमाकर्स (कैसपेस 3 और 7, और डीएनए क्षति) को प्रयोगात्मक और नियंत्रण संस्कृतियों में मापा गया था। संस्कृतियों को 5% सीओ₂ के साथ 37 डिग्री सेल्सियस पर एक ह्यूमिडिफायर इनक्यूबेटर में 24 घंटे के लिए इनक्यूबेट किया गया था। कोशिकाओं को तब ट्रिप्सिन का उपयोग करके अलग किया गया था और प्रवाह साइटोमेट्रिक सेल काउंट परख का उपयोग करके गणना की गई थी। कोशिकाओं को एनेक्सिन वी परख, एक माइटोकॉन्ड्रियल इलेक्ट्रोकेमिकल ट्रांसमेम्ब्रेन संभावित परख, एक कैसपेस 3/7 परख और एक डीएनए क्षति परख का उपयोग करके एपोप्टोसिस के लिए विश्लेषण किया गया था। यह लेख एपोप्टोसिस और पारंपरिक प्रवाह साइटोमेट्री का अवलोकन प्रदान करता है, और एसआईएचए कोशिकाओं के प्रसंस्करण और विश्लेषण के लिए प्रवाह साइटोमेट्रिक प्रोटोकॉल को विस्तृत करता है। परिणाम सकारात्मक, नकारात्मक और उप-इष्टतम प्रयोगात्मक डेटा का वर्णन करते हैं। इस विश्लेषणात्मक मंच का उपयोग करके एपोप्टोसिस के प्रवाह साइटोमेट्रिक विश्लेषण करने में व्याख्या और चेतावनी पर भी चर्चा की गई है। फ्लो साइटोमेट्रिक विश्लेषण एपोप्टोसिस के लिए प्रारंभिक और देर से बायोमार्कर का सटीक माप प्रदान करता है।