Analisi citometrica a flusso di biomarcatori apoptotici in cellule di cancro cervicale SiHa trattate con attinomicina D

I biomarcatori dell'apoptosi sono stati studiati nelle cellule di cancro cervicale SiHa trattate con actinomicina D utilizzando un citometro a flusso da banco. I primi biomarcatori (Annexin V e potenziale di membrana mitocondriale) e i biomarcatori tardivi (caspasi 3 e 7 e danno al DNA) di apoptosi sono stati misurati in colture sperimentali e di controllo. Le colture sono state incubate per 24 ore in un incubatore umidificato a 37 °C con il 5% di CO₂. Le cellule sono state quindi staccate utilizzando tripsina ed enumerate utilizzando un test di conteggio delle cellule citometriche a flusso. Le cellule sono state ulteriormente analizzate per l'apoptosi utilizzando un test di Annexin V, un saggio del potenziale transmembrana elettrochimico mitocondriale, un test della caspasi 3/7 e un test di danno al DNA. Questo articolo fornisce una panoramica dell'apoptosi e della citometria a flusso tradizionale ed elabora protocolli citometrici a flusso per l'elaborazione e l'analisi delle cellule SiHa. I risultati descrivono dati sperimentali positivi, negativi e sub-ottimali. Vengono inoltre discussi l'interpretazione e le avvertenze nell'esecuzione dell'analisi citometrica a flusso dell'apoptosi utilizzando questa piattaforma analitica. L'analisi citometrica a flusso fornisce una misurazione accurata dei biomarcatori precoci e tardivi per l'apoptosi.