Análise por citometria de fluxo de biomarcadores apoptóticos em células de câncer cervical SiHa tratadas com Actinomicina D

Biomarcadores de apoptose foram investigados em células de câncer cervical SiHa tratadas com actinomicina D usando um citômetro de fluxo de bancada. Biomarcadores precoces (anexina V e potencial de membrana mitocondrial) e biomarcadores tardios (caspases 3 e 7 e danos ao DNA) de apoptose foram medidos em culturas experimental e controle. As culturas foram incubadas por 24 horas em estufa umidificada a 37 °C com 5% de CO₂. As células foram então destacadas com tripsina e enumeradas por citometria de fluxo. As células foram posteriormente analisadas para apoptose usando um ensaio de anexina V, um ensaio de potencial transmembrana eletroquímico mitocondrial, um ensaio de caspase 3/7 e um ensaio de danos ao DNA. Este artigo fornece uma visão geral da apoptose e citometria de fluxo tradicional, e elabora protocolos de citometria de fluxo para processamento e análise de células SiHa. Os resultados descrevem dados experimentais positivos, negativos e subótimos. Também são discutidas interpretações e ressalvas na realização da análise por citometria de fluxo da apoptose utilizando esta plataforma analítica. A análise por citometria de fluxo fornece uma medida precisa de biomarcadores precoces e tardios para apoptose.