Aktinomisin D ile Tedavi Edilen SiHa Serviks Kanseri Hücrelerinde Apoptotik Biyobelirteçlerin Akış Sitometrik Analizi

Apoptoz biyobelirteçleri, aktinomisin D ile tedavi edilen SiHa serviks kanseri hücrelerinde bir tezgah üstü akış sitometresi kullanılarak araştırıldı. Deney ve kontrol kültürlerinde apoptozun erken biyobelirteçleri (Ek V ve mitokondriyal membran potansiyeli) ve geç biyobelirteçleri (kaspaz 3 ve 7 ve DNA hasarı) ölçüldü. Kültürler, %5 CO₂ ile 37 °C'de nemlendirilmiş bir inkübatörde 24 saat boyunca inkübe edildi. Hücreler daha sonra tripsin kullanılarak ayrıldı ve bir akış sitometrik hücre sayımı testi kullanılarak numaralandırıldı. Hücreler ayrıca bir Ek V testi, bir mitokondriyal elektrokimyasal transmembran potansiyel testi, bir kaspaz 3/7 testi ve bir DNA hasar testi kullanılarak apoptoz açısından analiz edildi. Bu makale, apoptoz ve geleneksel akış sitometrisine genel bir bakış sunmakta ve SiHa hücrelerinin işlenmesi ve analizi için akış sitometrik protokollerini detaylandırmaktadır. Sonuçlar pozitif, negatif ve sub-optimal deneysel verileri tanımlamaktadır. Ayrıca, bu analitik platformu kullanarak apoptozun akış sitometrik analizinin yapılmasında yorumlama ve uyarılar da tartışılmıştır. Akış sitometrik analizi, apoptoz için erken ve geç biyobelirteçlerin doğru bir şekilde ölçülmesini sağlar.