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Cancer Research

放线菌素D处理SiHa宫颈癌细胞中凋亡生物标志物的流式细胞术分析

Published: August 26th, 2021

DOI:

10.3791/62663

1Department of Chemical Pathology, Faculty of Health Sciences, University of Pretoria, 2Tshwane Academic Division, National Health Laboratory Service

Abstract

使用台式流式细胞仪在放线菌素D处理的SiHa宫颈癌细胞中研究了细胞凋亡生物标志物。在实验和对照培养物中测量细胞凋亡的早期生物标志物(膜联蛋白V和线粒体膜电位)和晚期生物标志物(半胱天冬酶3和7以及DNA损伤)。将培养物在37°C的加湿培养箱中用5%CO2孵育24小时。然后使用胰蛋白酶分离细胞并使用流式细胞术细胞计数测定计数。使用膜联蛋白V测定,线粒体电化学跨膜电位测定,半胱天冬酶3/7测定和DNA损伤测定进一步分析细胞的凋亡。本文概述了细胞凋亡和传统流式细胞术,并详细阐述了用于处理和分析SiHa细胞的流式细胞术方案。结果描述了阳性、阴性和次优实验数据。还讨论了使用该分析平台进行细胞凋亡流式细胞术分析的解释和注意事项。流式细胞术分析可准确测量细胞凋亡的早期和晚期生物标志物。

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