Abstract
Cancer Research
Apoptose biomarkers werden onderzocht in actinomycine D-behandelde SiHa baarmoederhalskankercellen met behulp van een benchtop flow cytometer. Vroege biomarkers (Annexine V en mitochondriaal membraanpotentiaal) en late biomarkers (caspasen 3 en 7, en DNA-schade) van apoptose werden gemeten in experimentele en controleculturen. Culturen werden gedurende 24 uur geïncubeerd in een bevochtigde incubator bij 37 °C met 5% CO2. De cellen werden vervolgens losgemaakt met behulp van trypsine en geïnventariseerd met behulp van een flowcytometrische celtellingstest. Cellen werden verder geanalyseerd op apoptose met behulp van een Annexin V-test, een mitochondriale elektrochemische transmembraanpotentiaaltest, een caspase 3/7-test en een DNA-schadetest. Dit artikel geeft een overzicht van apoptose en traditionele flowcytometrie en werkt flowcytometrische protocollen uit voor het verwerken en analyseren van SiHa-cellen. De resultaten beschrijven positieve, negatieve en suboptimale experimentele gegevens. Ook worden interpretatie en kanttekeningen besproken bij het uitvoeren van flowcytometrische analyse van apoptose met behulp van dit analytische platform. Flowcytometrische analyse biedt een nauwkeurige meting van vroege en late biomarkers voor apoptose.
Explore More Videos
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved