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Cancer Research

アクチノマイシンD処理SiHa子宮頸癌細胞におけるアポトーシスバイオマーカーのフローサイトメトリー解析

Published: August 26th, 2021

DOI:

10.3791/62663

1Department of Chemical Pathology, Faculty of Health Sciences, University of Pretoria, 2Tshwane Academic Division, National Health Laboratory Service

Abstract

アクチノマイシンD処理SiHa子宮頸がん細胞におけるアポトーシスバイオマーカーをベンチトップフローサイトメーターを用いて調査した。アポトーシスの初期バイオマーカー(アネキシンVおよびミトコンドリア膜電位)および後期バイオマーカー(カスパーゼ3および7、およびDNA損傷)を実験培養および対照培養で測定した。培養物を加湿インキュベーター内で37°C、5%CO2で24時間インキュベートした。次いで、細胞をトリプシンを用いて剥離し、フローサイトメトリー細胞数アッセイを用いて列挙した。細胞は、アネキシンVアッセイ、ミトコンドリア電気化学的膜貫通電位アッセイ、カスパーゼ3/7アッセイ、およびDNA損傷アッセイを用いて、アポトーシスについてさらに分析されました。この記事では、アポトーシスと従来のフローサイトメトリーの概要を説明し、SiHa細胞を処理および分析するためのフローサイトメトリープロトコルについて詳しく説明します。結果は、ポジティブ、ネガティブ、および次善の実験データを示しています。また、この分析プラットフォームを使用してアポトーシスのフローサイトメトリー分析を実行する際の解釈と注意点についても説明します。フローサイトメトリー分析は、アポトーシスの初期および後期バイオマーカーの正確な測定を提供します。

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