Synthèse et caractérisation de gouttelettes de porphyrine multimodales à changement de phase

Les gouttelettes à changement de phase sont une classe d’agents de contraste à ultrasons qui peuvent se convertir en microbulles échogéniques in situ avec l’application d’une énergie acoustique suffisante. Les gouttelettes sont plus petites et plus stables que leurs homologues à microbulles. Cependant, les agents de contraste à ultrasons traditionnels ne sont pas traçables au-delà des mesures de rétroaction acoustique, ce qui rend difficile la quantification de la biodiss distribution ou de l’accumulation ex vivo des agents de contraste. Les chercheurs pourraient devoir s’appuyer sur des particules diagnostiques compagnons fluorescentes ou optiquement absorbantes pour déduire la biodisponse. Le but de ce protocole est de détailler les étapes de création de gouttelettes de porphyrine multimodales à changement de phase à l’aide d’une méthode de condensation. Les porphyrines sont des molécules fluorescentes avec des bandes d’absorbance distinctes qui peuvent être conjuguées sur des lipides et incorporées dans des gouttelettes pour étendre la polyvalence des gouttelettes, permettant une bio-distribution plus robuste tout en conservant les propriétés acoustiques. Sept formulations avec des teneurs variables en porphyrine-lipides et en lipides de base ont été faites pour étudier les distributions de taille des microbulles et des gouttelettes. Des caractérisations adaptées aux structures contenant de la porphyrine sont également décrites dans le protocole pour démontrer leur polyvalence analytique en solution. Le dimensionnement a montré que les diamètres moyens post-condensés étaient de 1,72 à 2,38 fois plus petits que les populations de précurseurs. La caractérisation de l’absorbance a montré que les assemblages intacts avaient un pic en bande Q de 700 nm tandis que les échantillons perturbés avaient un pic d’absorbance à 671 nm. La caractérisation de la fluorescence a montré que 30% intacts des assemblages porphyrine-lipides étaient trempés par fluorescence (>97%), avec une récupération de fluorescence obtenue lors de la perturbation. La vaporisation acoustique a montré que les gouttelettes de porphyrine n’étaient pas échogènes à des pressions plus basses et pouvaient être converties en microbulles échogéniques avec des pressions suffisantes. Ces caractérisations montrent le potentiel des gouttelettes de porphyrine à éliminer le besoin de stratégies de diagnostic compagnon basées sur l’absorbance ou la fluorescence pour quantifier la biodisance des agents de contraste par ultrasons pour l’administration ou des applications thérapeutiques in vivo ou ex vivo.