3D Bioprinting av Murine Cortical Astrocytes for Engineering Neural-Lignende Vev

Astrocytter er glialceller med en viktig rolle i sentralnervesystemet (CNS), inkludert nevronal støtte og funksjonalitet. Disse cellene reagerer også på nevrale skader og virker for å beskytte vevet mot degenerative hendelser. In vitro-studier av astrocytters funksjonalitet er viktig for å belyse mekanismene som er involvert i slike hendelser og bidra til å utvikle terapier for å behandle nevrologiske lidelser. Denne protokollen beskriver en metode for å biofabrikkere en nevrallignende vevsstruktur rik på astrocytter ved 3D-bioprinting astrocytter-ladet bioink. En ekstruderingsbasert 3D-bioprinter ble brukt i dette arbeidet, og astrocytter ble ekstrahert fra C57Bl/6 mus valpenes hjerne kortikaler. Bioink ble tilberedt ved å blande kortikale astrocytter fra opptil passasje 3 til en biomaterialeløsning sammensatt av gelatin, gelatin-methacryloyl (GelMA) og fibrinogen, supplert med laminin, som presenterte optimale bioprintforhold. 3D-bioprintforholdene minimert cellestress, noe som bidro til den høye levedyktigheten til astrocyttene under prosessen, der 74,08% ± 1,33% av cellene var levedyktige rett etter bioprinting. Etter 1 uke med inkubasjon økte levedyktigheten til astrocytter betydelig til 83,54% ± 3,00%, noe som indikerer at 3D-konstruksjonen representerer et passende mikromiljø for cellevekst. Den biomaterialeriale sammensetningen tillot celletilknytning og stimulert astrocytisk oppførsel, med celler som uttrykker den spesifikke astrocyttene markør glial fibrillary acidic protein (GFAP) og har typisk astrocytisk morfologi. Denne reproduserbare protokollen gir en verdifull metode for biofabricate 3D nevrallignende vev rik på astrocytter som ligner cellenes innfødte mikromiljø, nyttig for forskere som tar sikte på å forstå astrocytters funksjonalitet og deres forhold til mekanismene som er involvert i nevrologiske sykdommer.