Hyperactief biggeBac Transposase-gemedieerde kiembaantransformatie in de herfst Legerworm, Spodoptera frugiperda

Stabiele insertie van genetische lading in insectengenomen met behulp van transponeerbare elementen is een krachtig hulpmiddel voor functionele genomische studies en het ontwikkelen van genetische plaagbestrijdingsstrategieën. Het meest gebruikte transponeerbare element in insectentransformatie is piggyBacen piggyBac-gebaseerdekiembaantransformatie is met succes uitgevoerd in modelinsecten. Het is echter nog steeds een uitdaging om deze technologie toe te passen in niet-modelinsecten die landbouwongedierte bevatten. Dit artikel rapporteert over kiembaantransformatie van een wereldwijde landbouwplaag, de herfstlegerworm (FAW), Spodoptera frugiperda, met behulp van het hyperactieve varkenBac transposase (hyPBase).

In dit werk werd het hyPBase-mRNA geproduceerd en gebruikt in plaats van helpplasmide in embryonale micro-injecties. Deze verandering leidde tot de succesvolle generatie van transgene FAW. Verder worden ook de methoden voor het screenen van transgene dieren, pcr-gebaseerde snelle detectie van transgene insertie en thermische asymmetrische interlaced PCR (TAIL-PCR) -gebaseerde bepaling van de integratieplaats beschreven. Dit artikel presenteert dus een protocol om transgene FAW te produceren, wat piggyBac-gebaseerdetransgenese in FAW en andere lepidoptera-insecten zal vergemakkelijken.