الدماغ بيريسيت الكالسيوم والتصوير الدموي في الفئران المعدلة وراثيا في فيفو

وقد جعلت التطورات الأخيرة في بيولوجيا البروتين وعلم الوراثة الماوس من الممكن لقياس تقلبات الكالسيوم داخل الخلايا من خلايا الدماغ في الجسم الحي وربط هذا مع الديناميكا الدموية المحلية. يستخدم هذا البروتوكول الفئران المعدلة وراثيا التي تم إعدادها مع نافذة الجمجمة المزمنة والتعبير عن مؤشر الكالسيوم المشفرة وراثيا، RCaMP1.07، تحت α الملساء العضلات actin المروج لتسمية الخلايا الجدارية على وجه التحديد، مثل خلايا العضلات الملساء الأوعية الدموية وingsheathing pericytes. وترد خطوات حول كيفية إعداد قسطرة الوريد الذيل للحقن الوريدي من الأصباغ الفلورية لتتبع تدفق الدم، فضلا عن كيفية قياس الكالسيوم بيريسيت الدماغ والديناميكا الدموية الأوعية الدموية المحلية (القطر، وسرعة خلايا الدم الحمراء، وما إلى ذلك) من قبل اثنين من المجهر الفوتون في الجسم الحي من خلال النافذة القحفية في الفئران مخدر الكيتامين / xylazine. وأخيرا، يتم توفير تفاصيل لتحليل تقلبات الكالسيوم وأفلام تدفق الدم عبر خوارزميات معالجة الصور التي وضعها باريت وآخرون 2018، مع التركيز على كيفية تكييف هذه العمليات مع بيانات التصوير الخلوي الأخرى.