होस्ट कोशिकाओं के लिए बैक्टीरियल पालन का स्वचालित, उच्च थ्रूपुट डिटेक्शन

उभरते जीवाणु रोगजनकों की पहचान मानव स्वास्थ्य और सुरक्षा के लिए महत्वपूर्ण है । मेजबान कोशिकाओं के लिए जीवाणु पालन जीवाणु संक्रमण में एक आवश्यक कदम है और संभावित खतरे की एक बानगी का गठन किया । इसलिए, कोशिकाओं की मेजबानी के लिए बैक्टीरिया के पालन की जांच बैक्टीरिया खतरे के आकलन के एक घटक के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है । मेजबान कोशिकाओं के लिए जीवाणु पालन की गणना के लिए एक मानक विधि मेजबान कोशिकाओं के साथ बैक्टीरिया को सह-इनक्यूबेट करना, अनुयायी बैक्टीरिया को फसल करना, ठोस मीडिया पर काटा गया कोशिकाओं को प्लेट करना, और फिर परिणामी कॉलोनी बनाने वाली इकाइयों (सीआईएफयू) को गिनना है। वैकल्पिक रूप से, मेजबान कोशिकाओं के जीवाणु पालन का मूल्यांकन इम्यूनोफ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोपी-आधारित दृष्टिकोणों का उपयोग करके किया जा सकता है। हालांकि, इन दृष्टिकोणों को लागू करने के लिए पारंपरिक रणनीतियां समय लेने वाली और अक्षम हैं । यहां, हाल ही में विकसित स्वचालित फ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोपी आधारित इमेजिंग विधि का वर्णन किया गया है। जब उच्च थ्रूपुट छवि प्रसंस्करण और सांख्यिकीय विश्लेषण के साथ संयुक्त किया जाता है, तो विधि मेजबान कोशिकाओं का पालन करने वाले बैक्टीरिया के तेजी से मात्राकरण को सक्षम बनाती है। प्रोटोकॉल को प्रदर्शित करने के लिए दो जीवाणु प्रजातियों, ग्राम-नकारात्मक स्यूडोमोनास एरुगिनोसा और ग्राम-सकारात्मक लिस्टेरिया मोनोसाइटोजीन और इसी नकारात्मक नियंत्रण का परीक्षण किया गया । परिणाम बताते हैं कि यह दृष्टिकोण तेजी से और सही रूप से अनुयायी बैक्टीरिया की गणना करता है और प्रयोगात्मक वर्कलोड और समयसीमा को काफी कम कर देता है।