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Abstract

Cancer Research

荧光显微镜用于人肿瘤细胞和肿瘤异种移植小鼠中巨细胞增多介导的ATP内化

Published: June 30th, 2021

DOI:

10.3791/62768

1Department of Biological Sciences, Ohio University, 2Molecular and Cellular Biology Program, Ohio University, 3Neuroscience Program, Ohio University, 4Edison Biotechnology Institute, Ohio University, 5Translational Biomedical Sciences Program, Ohio University, 6Honors Tutorial College, Ohio University, 7Department of Biomedical Sciences, Heritage College of Osteopathic Medicine, Ohio University
* These authors contributed equally

Abstract

三磷酸腺苷(ATP),包括细胞外ATP(eATP),已被证明在肿瘤发生的各个方面起重要作用,例如耐药性,上皮间充质转变(EMT)和转移。肿瘤内eATP的浓度比正常组织高103 至104 倍。虽然eATP作为激活嘌呤能信号传导的信使进行EMT诱导,但它也通过上调巨噬细胞增多症(一种特定类型的内吞作用)被癌细胞内化,以执行各种生物学功能。这些功能包括为需要ATP的生化反应提供能量,在信号转导期间捐赠磷酸基团,以及促进或加速作为转录辅因子的基因表达。ATP唾手可得,其在癌症等领域的研究无疑将会增加。然而,eATP研究仍处于早期阶段,在eATP和内化细胞内ATP所发挥的重要和多功能活动可以完全解开之前,尚未解决的问题仍未得到解答。

这些作者的实验室对这些早期eATP研究的贡献包括不可水解荧光ATP的显微成像,以及高分子量和低分子量荧光葡聚糖,其用作巨噬细胞增多和内吞作用示踪剂,以及各种内吞作用抑制剂,以监测和表征eATP内化过程。该成像方式应用于肿瘤细胞系和免疫缺陷小鼠,异种移植人癌症肿瘤, 以研究eATP在体外体内的内化。本文描述了这些 体外体内 方案,重点是修改和微调测定条件,以便可以在不同的系统中成功进行巨噬细胞增生/内吞作用介导的eATP内化测定。

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