A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Abstract
Cancer Research
三磷酸腺苷(ATP),包括细胞外ATP(eATP),已被证明在肿瘤发生的各个方面起重要作用,例如耐药性,上皮间充质转变(EMT)和转移。肿瘤内eATP的浓度比正常组织高103 至104 倍。虽然eATP作为激活嘌呤能信号传导的信使进行EMT诱导,但它也通过上调巨噬细胞增多症(一种特定类型的内吞作用)被癌细胞内化,以执行各种生物学功能。这些功能包括为需要ATP的生化反应提供能量,在信号转导期间捐赠磷酸基团,以及促进或加速作为转录辅因子的基因表达。ATP唾手可得,其在癌症等领域的研究无疑将会增加。然而,eATP研究仍处于早期阶段,在eATP和内化细胞内ATP所发挥的重要和多功能活动可以完全解开之前,尚未解决的问题仍未得到解答。
这些作者的实验室对这些早期eATP研究的贡献包括不可水解荧光ATP的显微成像,以及高分子量和低分子量荧光葡聚糖,其用作巨噬细胞增多和内吞作用示踪剂,以及各种内吞作用抑制剂,以监测和表征eATP内化过程。该成像方式应用于肿瘤细胞系和免疫缺陷小鼠,异种移植人癌症肿瘤, 以研究eATP在体外 和 体内的内化。本文描述了这些 体外 和 体内 方案,重点是修改和微调测定条件,以便可以在不同的系统中成功进行巨噬细胞增生/内吞作用介导的eATP内化测定。
Explore More Videos
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved