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Cancer Research

切除された固形腫瘍均質物のミトコンドリア機能の分析的決定

Published: August 6th, 2021

DOI:

10.3791/62875

1Integrated Physiology and Molecular Medicine Laboratory, Pennington Biomedical Research Center, 2Clinical Oncology and Metabolism, Pennington Biomedical Research Center, 3Department of Nutrition, Case Western Reserve University, 4Department of Clinical Nutrition, University of Texas Southwestern Medical Center

Abstract

ミトコンドリアは、エネルギー産生、活性酸素種調節、高分子合成を通じたがんの発症と進行に不可欠です。ミトコンドリアの腫瘍環境への遺伝的および機能的適応は、増殖および転移性の可能性を促進する。DNAとRNAシーケンシングの出現は、腫瘍形成の遺伝メディエーターの評価に重大な障壁を取り除いた。しかし、これまで、腫瘍ミトコンドリア機能を評価するための方法論的アプローチは依然として不可解であり、実現可能性を制限する技術的能力を必要とし、最終的には実験および臨床の両方の設定で診断および予後値を減少させる。ここでは、高解像呼吸法を用いて、新たに摘出した固形腫瘍均質物における酸化リン酸化(OXPHOS)および電子移動(ET)容量の定量化を簡単かつ迅速に行う方法を概説する。このプロトコルは、種および腫瘍タイプ間で再現的に適用できるだけでなく、ミトコンドリアET経路の多様性を評価するために適応することができる。このプロトコルを用いて、発光B乳腺癌を有するマウスが、OXPHOSを介してアデノシン三リン酸を生成するためにコハク酸に対する欠陥ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド結合呼吸および依存を示すことを実証する。

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