マウス後肢モデルにおける動脈形成中の白血球動員モニタリングのための多光子生体内イメージング

動脈形成は、成長する側副血管の血管周囲腔への白血球および血小板動員に強く依存する。動脈形成における側副動脈および白血球を分析するための標準的なアプローチは、 ex vivo (免疫)組織学的方法論である。ただし、この手法では、血流、せん断応力、細胞間相互作用、粒子速度などの動的プロセスを測定できません。この論文は、生体内イメージングを利用して、動脈形成中に成長する側副動脈の in vivo プロセスを監視するためのプロトコルを提示します。ここで説明する方法は、ダイナミクス測定のための信頼性の高いツールであり、多光子励起顕微鏡によって提供される最小限の光細胞毒性で高コントラスト分析を提供します。成長する側副動脈を分析する前に、大腿動脈の片側結紮によってマウスの内転筋に動脈形成が誘導された。

結紮後、せん断応力の増加により既存の側副動脈が成長し始めました。術後24時間で側副動脈の上の皮膚と皮下脂肪を取り除き、さらなる分析のためのポケットを構築した。in vivoイメージング中の血流および免疫細胞を視覚化するために、CD41-フルオレセインイソチオシアネート(FITC)(血小板)およびCD45-フィコエリスリン(PE)(白血球)抗体を、マウスの尾静脈に配置されたカテーテルを介して静脈内(i.v.)注射した。この記事では、動脈形成に関連するプロセスを研究するために、一般的に使用される静的ex vivo(免疫)組織学的分析の代替またはin vivo補完として、生体内多光子イメージングを紹介します。要約すると、この論文は、動脈形成の後肢モデルにおける免疫細胞輸送、血流、およびせん断応力を調査するための新規で動的なin vivo法について説明し、評価の可能性を著しく高めます。