JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

Abstract

Cancer Research

Manuel konstruktion af et vævsmikroarray ved hjælp af båndmetoden og et håndholdt mikroarrayer

Published: June 10th, 2022

DOI:

10.3791/63086

1Department of Research, Mayo Clinic, 2Department of Laboratory Medicine and Pathology, Mayo Clinic

Abstract

Vævsmikroarray (TMA) er et vigtigt forskningsværktøj, hvor mange formalinfikserede paraffinindlejrede (FFPE) prøver kan repræsenteres i en enkelt paraffinblok. Dette opnås ved at anvende vævskerner ekstraheret fra interesseområdet for forskellige donor FFPE-blokke og arrangere dem i en enkelt TMA-paraffinblok. Når de er konstrueret, kan sektioner fra den færdige TMA bruges til at udføre immunohistokemi, kromogen, fluorescens in situ-hybridisering (FISH) og RNA ISH-undersøgelser til vurdering af proteinekspression samt genomiske og transkriptionelle ændringer i mange prøver samtidigt, hvilket minimerer vævsbrug og reducerer reagensomkostningerne. Der findes flere forskellige TMA konstruktionsteknikker. En af de mest almindelige konstruktionsmetoder er modtagermetoden, som fungerer bedst med kerner af samme længde, for hvilke der anbefales en minimumslængde på 4 mm. Desværre kan vævsblokke stærkt resekteres under diagnoseprocessen, hvilket ofte resulterer i "ikke-ideelle" donorbloktykkelser på mindre end 4 mm. Den aktuelle artikel og video fokuserer på den dobbeltsidede klæbebåndsmetode; en alternativ manuel, billig, nem at bruge og hurtig metode til at konstruere TMA'er med lav densitet (<50 kerner), der er yderst kompatible med disse ikke-ideelle donorblokke. Denne protokol giver en trinvis vejledning i, hvordan man konstruerer en TMA ved hjælp af denne metode med fokus på den kritiske betydning af patologisk gennemgang og validering efter konstruktion.

Explore More Videos

Kr ftforskning

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved